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Calculadora de concentración de ARN

Estima la concentración de ARN a partir de una lectura de absorbancia a 260 nm, el factor de dilución, la longitud de paso óptico y el factor de conversión utilizado en tu protocolo. Además de la concentración principal, muestra la equivalencia de unidades y la dilución aproximada necesaria para alcanzar una concentración objetivo.

Calculadora

Espectrofotometría y dilución
Lectura corregida con blanco.
Ejemplo: 10 para una dilución 1:10.
Para ARN monocatenario suele emplearse 40.
Se usa para estimar la dilución necesaria.

Cómo usar esta calculadora

  1. Introduce la absorbancia A260 corregida con blanco.
  2. Indica el factor de dilución aplicado antes de la lectura.
  3. Ajusta la longitud de paso óptico y el factor de conversión del método.
  4. Escribe una concentración objetivo y pulsa Calcular.

Fórmula

C (ng/µL) = A260 × factor de ARN × factor de dilución ÷ longitud de paso (cm)

La equivalencia numérica entre µg/mL y ng/µL es 1:1.

Qué significa el resultado

El resultado principal expresa la concentración estimada del ARN original. La dilución objetivo indica cuántas veces tendría que diluirse la muestra si la concentración actual supera la meta.

La absorbancia puede verse afectada por contaminantes, turbidez y límites del instrumento. Utiliza controles de calidad y el protocolo de tu laboratorio.

Ejemplo de cálculo

Con A260 = 0,25, dilución 1:10, paso óptico de 1 cm y factor 40, la concentración es 0,25 × 40 × 10 = 100 ng/µL. Para un objetivo de 50 ng/µL, la dilución total requerida sería 2×.

Consejos para obtener mejores resultados

  • Resta correctamente el blanco antes de introducir A260.
  • Evita lecturas fuera del rango lineal del espectrofotómetro.
  • Confirma si tu instrumento corrige automáticamente la longitud de paso óptico.
  • Usa el factor de conversión específico del tipo de ácido nucleico y del método.
  • Interpreta la concentración junto con indicadores de pureza y calidad cuando estén disponibles.

Preguntas frecuentes

¿Cómo convierto una lectura A260 en concentración de ARN?

La calculadora multiplica A260 por el factor de conversión y por la dilución, y corrige por la longitud de paso óptico.

¿Qué factor de conversión debo usar para ARN monocatenario?

Un valor habitual es 40 µg/mL por unidad de A260 con paso óptico de 1 cm, pero conviene usar el factor recomendado por el método o instrumento.

¿Por qué la concentración en µg/mL coincide numéricamente con ng/µL?

Porque 1 µg/mL equivale exactamente a 1 ng/µL.

¿Qué ocurre si uso una cubeta con paso óptico distinto de 1 cm?

La concentración se divide por la longitud de paso óptico introducida para aplicar la corrección correspondiente.

¿Cómo sé cuánto debo diluir mi ARN hasta una concentración objetivo?

Si la concentración calculada es mayor que la objetivo, el cociente entre ambas indica el factor total de dilución aproximado necesario.

Variables de cuantificación

ParámetroFunción
A260Señal de absorbancia a 260 nm.
Factor de diluciónReconstruye la concentración de la muestra original.
Paso ópticoCorrige la relación absorbancia-concentración.
Concentración objetivoPermite estimar la dilución posterior.

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